毛細管電泳的使用方法介紹

　　毛細管電泳是以彈性石英毛細管為分離通道，以高壓直流電場為驅(qū)動力，依據(jù)樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實現(xiàn)分離的電泳分離分析方法。

　　毛細管電泳的使用方法介紹：

　　（1）按照儀器操作手冊開機，預(yù)熱、輸入各項參數(shù)，如毛細管溫度、操作電壓、檢測波長和沖洗程序等。操作緩沖液需過濾和脫氣。沖洗液、緩沖液等放置于樣品瓶中，依次放入進樣器。

　　（2）毛細管處理的好壞，對測定結(jié)果影響很大。未涂層新毛細管要用較濃堿液在較高溫度（例如用1mol/L氫氧化鈉溶液在60℃）沖洗，使毛細管內(nèi)壁生成硅羥基，再依次用0.1mol/L氫氧化鈉溶液、水和操作緩沖液各沖洗數(shù)分鐘。兩次進樣中間可僅用緩沖液沖洗，但若發(fā)現(xiàn)分離性能改變，則開始須用0.1mol/L氫氧化鈉溶液沖洗，甚至要用濃氫氧化鈉溶液升溫沖洗。凝膠毛細管、涂層毛細管、填充毛細管的沖洗則應(yīng)按照所附說明書操作。沖洗時將盛溶液的試樣瓶依次置于進樣器，設(shè)定順序和時間進行。

　?。?）操作緩沖液的種類、pH值和濃度，以及添加劑［用以增加溶質(zhì)的溶解度和（或）控制溶質(zhì)的解離度，手性拆分等］的選定對測定結(jié)果的影響也很大，應(yīng)照各品種項下的規(guī)定配制，根據(jù)初試的結(jié)果調(diào)整、優(yōu)化。

　?。?）將待測供試品溶液瓶置于進樣器中，設(shè)定操作參數(shù)，如進樣壓力（電動進樣電壓）、進樣時間、正極或負極進樣、操作電壓或電流、檢測器參數(shù)等，開始測試。根據(jù)初試的電泳譜圖調(diào)整儀器參數(shù)和操作緩沖液，以獲得優(yōu)化結(jié)果。而后用優(yōu)化條件正式測試。

　?。?）測試完畢后用水沖洗毛細管，注意將毛細管兩端浸入水中保存，如果長久不用應(yīng)將毛細管用氮吹干，最后關(guān)機。

　?。?）定量測定以采用內(nèi)標(biāo)法為宜。用加壓或減壓法進樣時，供試品溶液黏度會影響進樣體積，應(yīng)注意保持試樣溶液和對照溶液黏度一致；用電動法進樣時，被測組分因電歧視現(xiàn)象和溶液離子強度會影響待測組分的遷移量，也要注意其影響。